- 刘晴;刘梦潜;王芬;怀美玉;王丽;董彩虹;
蛹虫草是一种重要的食药用真菌，其子座可规模化栽培。然而，栽培中菌种极易退化，成为限制其发展的重要因素，野生种质资源为蛹虫草栽培生产菌株的重要来源。本研究对东北和山东部分地区蛹虫草资源进行了持续调查，对其生态分布和宏观、微观形态等进行了系统研究。从5个地点共采集野生蛹虫草标本414份，寄主绝大多数为鳞翅目昆虫的蛹，少数为鳞翅目昆虫的幼虫和茧。野生蛹虫草子座单生或2–25根，长1–17cm，棒状、扁平状或不规则畸形，扁平状子座常具纵沟，部分可分支；子座可从寄主头、胸和腹部各部位长出，其中以头部为主。子座地上部分长1–6 cm，颜色呈深橙黄色。可育部位长0.5–4 cm，宽1.2–6 mm，大多数与不育柄部分界明显；地下部分0.5–11 cm，其长度与腐殖质厚度相关。首次明确观察到蛹虫草菌索，菌索连接蛹体和子座，或单从子座、蛹体上长出，但不是所有野生蛹虫草都有菌索。蛹虫草菌索与子座内部的疏丝组织菌丝形态各异，菌索菌丝中间膨大。人工栽培与野外采集的子座宏观形态差异明显，但子囊和子囊孢子形态无明显差异。通过野外采集和调研，获得了大量的野生蛹虫草种质资源，为解决蛹虫草种业问题奠定基础。
2022年11期 v.41;No.233 1761-1771页 [查看摘要][在线阅读][下载 1925K] [下载次数：353 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 梁静;李秀璋;陈建博;唐楚煜;王涛;李玉玲;
冬虫夏草是青藏高原的珍稀物种，具有较高的药用和经济价值，然而其资源的数量特征、空间分布格局及适宜度尚不清晰。本研究以青海省冬虫夏草资源生境条件为依据，以海拔、植被、土壤、气温和降水量作为主要指标，利用地理信息系统(geographic information system,GIS)的空间分析方法对青海省冬虫夏草资源适宜性及空间分布进行分析，并用野外实地采样进行验证。研究表明：玉树州的玉树市、杂多县、称多县、曲麻莱县；果洛州的玛沁县、达日县、甘德县等区域多处在适宜区；海北州的祁连县、刚察县，黄南州的泽库县、河南县、同仁县，玉树州的治多县、囊谦县，海南州的兴海县、同德县、贵南县及其他产冬虫夏草县的部分区域为较适宜区；西宁市的大通县，海东市的互助县和海西州的低海拔地区为不适宜区。整个青藏高原具有冬虫夏草分布面积占当地县域国土面积的76.2%。在青海省具有冬虫夏草分布的地区(市/州)中，玉树州和果洛州冬虫夏草分布的面积占当地县域国土面积的88.3%–99.6%，海北州、海东市、海南州、海西州、黄南州和西宁市冬虫夏草分布面积占当地县域国土面积的30.2%–96.5%。综合区划图能比较真实地反映青海省冬虫夏草资源的空间分布格局，区划结果与实地调查结果相符，表明利用空间分析方法进行冬虫夏草资源的适宜性分布区域的划分是可行的，该研究为合理开发和科学利用冬虫夏草野生资源提供理论依据。
2022年11期 v.41;No.233 1772-1785页 [查看摘要][在线阅读][下载 3521K] [下载次数：673 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 郝转;张成花;黄秋菊;黄浩;李泰辉;王刚正;邓旺秋;
DnaJ蛋白(热激蛋白40)在机体生长发育和适应逆境环境过程中起着重要作用。以广东虫草GDGM30035为材料，克隆获得CgDnaJ05基因，CDS为2361bp，编码786个氨基酸，生物信息学分析结果表明CgDnaJ05蛋白含有DnaJ蛋白结构域，属于碱性、不稳定和亲水性蛋白质。以CgDnaJ05蛋白DnaJ保守结构域240 bp的反向互补片段为干扰片段，构建CgDnaJ05基因的双向启动子沉默载体；通过根癌农杆菌Agrobacteriumtumefaciens介导转化法侵染广东虫草菌丝，筛选获得9个相对稳定的CgDnaJ05沉默转化子。qRT-PCR分析表明，转化子CgDnaJ05相对表达量下调至野生型菌株的20%–82%；与野生菌丝相比，转化子菌丝生长速度显著下降，且CgDnaJ05下调越明显，菌丝减缓速度越显著，同时，转化子原基的形成受到显著抑制。研究表明：广东虫草CgDnaJ05基因明显影响广东虫草菌丝生长和原基形成，对广东虫草生长发育具有重要的调控作用。
2022年11期 v.41;No.233 1786-1795页 [查看摘要][在线阅读][下载 1665K] [下载次数：217 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 范卫锋;李皓翔;李文佳;庄诗诗;贺媛;占心佾;梅全喜;钱正明;
虫草类药材采用85%乙醇超声提取游离甾醇、采用0.5mol/L氢氧化钾-乙醇溶液回流提取总甾醇，并用绿色溶剂(乙醇和水)固相萃取法纯化分析溶液。用HPLC-ELSD法测定麦角甾醇、胆甾醇和谷甾醇的含量，色谱柱为Poroshell 120 EC-C18 (100 mm×4.6mm, 2.7μm)，绿色流动相乙醇-水(89:11)，流速为0.5 mL/min，结果表明所建立的分析方法 3种甾醇成分在考察的浓度范围内，线性关系好、精密度和准确度高。20批虫草类样品均含结合型甾醇和游离型甾醇；冬虫夏草繁育品与野生品均含3种甾醇，两者含量相当；凉山虫草(野生品)、蛹虫草(培植品)、蝉花(野生品)可检测到麦角甾醇。该方法可有效鉴别冬虫夏草和其他3种虫草产品，为虫草类产品质量评价提升提供了依据。
2022年11期 v.41;No.233 1796-1806页 [查看摘要][在线阅读][下载 1527K] [下载次数：541 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 樊香萍;张姝;张永杰;
虫草在世界范围内广泛分布，具有多种生物活性及较高的食药用价值。为进一步丰富虫草真菌资源，本研究对从广东韶关丹霞山采集到的一份野生虫草样品进行了菌株的分离鉴定、生物活性评价和子实体的诱导培养。通过形态学和系统发育分析，将菌株ZYJ0835鉴定为布莱克韦尔虫草Cordycepsblackwelliae。利用5种不同的培养基进行液体发酵培养，发现该菌株的发酵上清液和菌丝体均具有抗氧化和纤溶活性。此外，该菌株还具有一定的抑菌活性。利用大米、小麦、柞蚕蛹3种培养基质，均成功诱导出子实体，并且人工培养的子实体也具有抗氧化和纤溶活性。本研究首次在中国境内报道布莱克韦尔虫草的分布，为进一步开发利用该虫草资源提供了理论依据。
2022年11期 v.41;No.233 1807-1818页 [查看摘要][在线阅读][下载 1971K] [下载次数：201 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 怀美玉;刘晴;徐方旭;王升厚;董彩虹;
蛹虫草菌株在继代培养和低温长期保藏过程中极易退化导致子实体产量下降，对产业造成重大影响。本研究以正常菌株、PDA斜面长期4℃保藏导致退化的菌株和连续继代培养的菌株为材料，观察其子实体、菌落、菌丝形态和分生孢子数量，对菌丝细胞核、线粒体、活性氧积累和芽生孢子内脂滴进行染色观察；并对菌丝中虫草素、腺苷和麦角甾醇含量进行比较分析。结果表明PDA斜面长期4℃保藏和连续继代培养导致的蛹虫草菌株退化表型大多数一致，即退化菌株较正常菌株子实体产量降低、菌丝粘连打结、分生孢子数量显著降低、菌丝活性氧含量升高、细胞内线粒体数量减少、芽生孢子脂滴由弥散的小脂滴融合为大脂滴。然而，在菌落见光转色方面，长期低温保藏退化菌株基本不转色，而继代培养退化菌株转色不稳定；长期保藏退化菌株菌丝细胞核数目无明显变化，继代培养退化菌株细胞核数量明显减少；长期保藏退化菌株菌丝中虫草素、腺苷和麦角甾醇含量较正常菌株降低58%、41%和70%，继代培养退化菌株麦角甾醇含量无明显变化。因此，显微观察菌丝是否出现粘连打结及氮蓝四唑NBT检测菌丝活性氧含量，操作简单、用时较短，可用于大规模生产中蛹虫草菌株退化的检测手段；线粒体和脂滴染色也可作为退化菌株的鉴别方法；而生产中常用的通过菌落见光转色判断菌株优劣的方法需要慎重。继代培养菌株第4代开始出现明显的退化特征，因此在生产中使用的菌株最好控制在继代培养3代以内。
2022年11期 v.41;No.233 1819-1830页 [查看摘要][在线阅读][下载 1828K] [下载次数：695 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ]